pK-eCFP

176559 Synthetic Yeast Expression

Plasmid Information

Purpose

Expression of eCFP for auxotrophic selection in the absence of histidine

Depositor

Markus Ralser

Article

Olin-Sandoval et al Nature. 2019 Aug;572(7768):249-253. doi:

Insert

eCFP

Promoter

TDH1(GAP)

Available Since

Dec. 23, 2021

Availability

Available

Sequence Information

Length

9,761 bp

Topology

circular

Molecule Type

other DNA

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Features

CDS 3

Label	Gene	Product	Position	Strand
LYS2	S. cerevisiae LYS2	alpha-aminoadipate reductase, required …	404..4583	Fwd
DNA Sequence ATGACTAACGAAAAGGTCTGGATAGAGAAGTTGGATAATCCAACTCTTTCAGTGTTACCACATGACTTTTTACGCCCACAACAAGAACCTTATACGAAACAAGCTACATATTCGTTACAGCTACCTCAGCTCGATGTGCCTCATGATAGTTTTTCTAACAAATACGCTGTCGCTTTGAGTGTATGGGCTGCATTGATATATAGAGTAACCGGTGACGATGATATTGTTCTTTATATTGCGAATAACAAAATCTTAAGATTCAATATTCAACCAACGTGGTCATTTAATGAGCTGTATTCTACAATTAACAATGAGTTGAACAAGCTCAATTCTATTGAGGCCAATTTTTCCTTTGACGAGCTAGCTGAAAAAATTCAAAGTTGCCAAGATCTGGAAAGGACCCCTCAGTTGTTCCGTTTGGCCTTTTTGGAAAACCAAGATTTCAAATTAGACGAGTTCAAGCATCATTTAGTGGACTTTGCTTTGAATTTGGATACCAGTAATAATGCGCATGTTTTGAACTTAATTTATAACAGCTTACTGTATTCGAATGAAAGAGTAACCATTGTTGCGGACCAATTTACTCAATATTTGACTGCTGCGCTAAGCGATCCATCCAATTGCATAACTAAAATCTCTCTGATCACCGCATCATCCAAGGATAGTTTACCTGATCCAACTAAGAACTTGGGCTGGTGCGATTTCGTGGGGTGTATTCACGACATTTTCCAGGACAATGCTGAAGCCTTCCCAGAGAGAACCTGTGTTGTGGAGACTCCAACACTAAATTCCGACAAGTCCCGTTCTTTCACTTATCGCGACATCAACCGCACTTCTAACATAGTTGCCCATTATTTGATTAAAACAGGTATCAAAAGAGGTGATGTAGTGATGATCTATTCTTCTAGGGGTGTGGATTTGATGGTATGTGTGATGGGTGTCTTGAAAGCCGGCGCAACCTTTTCAGTTATCGACCCTGCATATCCCCCAGCCAGACAAACCATTTACTTAGGTGTTGCTAAACCACGTGGGTTGATTGTTATTAGAGCTGCTGGACAATTGGATCAACTAGTAGAAGATTACATCAATGATGAATTGGAGATTGTTTCAAGAATCAATTCCATCGCTATTCAAGAAAATGGTACCATTGAAGGTGGCAAATTGGACAATGGCGAGGATGTTTTGGCTCCATATGATCACTACAAAGACACCAGAACAGGTGTTGTAGTTGGACCAGATTCCAACCCAACCCTATCTTTCACATCTGGTTCCGAAGGTATTCCTAAGGGTGTTCTTGGTAGACATTTTTCCTTGGCTTATTATTTCAATTGGATGTCCAAAAGGTTCAACTTAACAGAAAATGATAAATTCACAATGCTGAGCGGTATTGCACATGATCCAATTCAAAGAGATATGTTTACACCATTATTTTTAGGTGCCCAATTGTATGTCCCTACTCAAGATGATATTGGTACACCGGGCCGTTTAGCGGAATGGATGAGTAAGTATGGTTGCACAGTTACCCATTTAACACCTGCCATGGGTCAATTACTTACTGCCCAAGCTACTACACCATTCCCTAAGTTACATCATGCGTTCTTTGTGGGTGACATTTTAACAAAACGTGATTGTCTGAGGTTACAAACCTTGGCAGAAAATTGCCGTATTGTTAATATGTACGGTACCACTGAAACACAGCGTGCAGTTTCTTATTTCGAAGTTAAATCAAAAAATGACGATCCAAACTTTTTGAAAAAATTGAAAGATGTCATGCCTGCTGGTAAAGGTATGTTGAACGTTCAGCTACTAGTTGTTAACAGGAACGATCGTACTCAAATATGTGGTATTGGCGAAATAGGTGAGATTTATGTTCGTGCAGGTGGTTTGGCCGAAGGTTATAGAGGATTACCAGAATTGAATAAAGAAAAATTTGTGAACAACTGGTTTGTTGAAAAAGATCACTGGAATTATTTGGATAAGGATAATGGTGAACCTTGGAGACAATTCTGGTTAGGTCCAAGAGATAGATTGTACAGAACGGGTGATTTAGGTCGTTATCTACCAAACGGTGACTGTGAATGTTGCGGTAGGGCTGATGATCAAGTTAAAATTCGTGGGTTCAGAATCGAATTAGGAGAAATAGATACGCACATTTCCCAACATCCATTGGTAAGAGAAAACATTACTTTAGTTCGCAAAAATGCCGACAATGAGCCAACATTGATCACATTTATGGTCCCAAGATTTGACAAGCCAGATGACTTGTCTAAGTTCCAAAGTGATGTTCCAAAGGAGGTTGAAACTGACCCTATAGTTAAGGGCTTAATCGGTTACCATCTTTTATCCAAGGACATCAGGACTTTCTTAAAGAAAAGATTGGCTAGCTATGCTATGCCTTCCTTGATTGTGGTTATGGATAAACTACCATTGAATCCAAATGGTAAAGTTGATAAGCCTAAACTTCAATTCCCAACTCCCAAGCAATTAAATTTGGTAGCTGAAAATACAGTTTCTGAAACTGACGACTCTCAGTTTACCAATGTTGAGCGCGAGGTTAGAGACTTATGGTTAAGTATATTACCTACCAAGCCAGCATCTGTATCACCAGATGATTCGTTTTTCGATTTAGGTGGTCATTCTATCTTGGCTACCAAAATGATTTTTACCTTAAAGAAAAAGCTGCAAGTTGATTTACCATTGGGCACAATTTTCAAGTATCCAACGATAAAGGCCTTTGCCGCGGAAATTGACAGAATTAAATCATCGGGTGGATCATCTCAAGGTGAGGTCGTCGAAAATGTCACTGCAAATTATGCGGAAGACGCCAAGAAATTGGTTGAGACGCTACCAAGTTCGTACCCCTCTCGAGAATATTTTGTTGAACCTAATAGTGCCGAAGGAAAAACAACAATTAATGTGTTTGTTACCGGTGTCACAGGATTTCTGGGCTCCTACATCCTTGCAGATTTGTTAGGACGTTCTCCAAAGAACTACAGTTTCAAAGTGTTTGCCCACGTCAGGGCCAAGGATGAAGAAGCTGCATTTGCAAGATTACAAAAGGCAGGTATCACCTATGGTACTTGGAACGAAAAATTTGCCTCAAATATTAAAGTTGTATTAGGCGATTTATCTAAAAGCCAATTTGGTCTTTCAGATGAGAAGTGGATGGATTTGGCAAACACAGTTGATATAATTATCCATAATGGTGCGTTAGTTCACTGGGTTTATCCATATGCCAAATTGAGGGATCCAAATGTTATTTCAACTATCAATGTTATGAGCTTAGCCGCCGTCGGCAAGCCAAAGTTCTTTGACTTTGTTTCCTCCACTTCTACTCTTGACACTGAATACTACTTTAATTTGTCAGATAAACTTGTTAGCGAAGGGAAGCCAGGCATTTTAGAATCAGACGATTTAATGAACTCTGCAAGCGGGCTCACTGGTGGATATGGTCAGTCCAAATGGGCTGCTGAGTACATCATTAGACGTGCAGGTGAAAGGGGCCTACGTGGGTGTATTGTCAGACCAGGTTACGTAACAGGTGCCTCTGCCAATGGTTCTTCAAACACAGATGATTTCTTATTGAGATTTTTGAAAGGTTCAGTCCAATTAGGTAAGATTCCAGATATCGAAAATTCCGTGAATATGGTTCCAGTAGATCATGTTGCTCGTGTTGTTGTTGCTACGTCTTTGAATCCTCCCAAAGAAAATGAATTGGCCGTTGCTCAAGTAACGGGTCACCCAAGAATATTATTCAAAGACTACTTGTATACTTTACACGATTATGGTTACGATGTCGAAATCGAAAGCTATTCTAAATGGAAGAAATCATTGGAGGCGTCTGTTATTGACAGGAATGAAGAAAATGCGTTGTATCCTTTGCTACACATGGTCTTAGACAACTTACCTGAAAGTACCAAAGCTCCGGAACTAGACGATAGGAACGCCGTGGCATCTTTAAAGAAAGACACCGCATGGACAGGTGTTGATTGGTCTAATGGAATAGGTGTTACTCCAGAAGAGGTTGGTATATATATTGCATTTTTAAACAAGGTTGGATTTTTACCTCCACCAACTCATAATGACAAACTTCCACTGCCAAGTATAGAACTAACTCAAGCGCAAATAAGTCTAGTTGCTTCAGGTGCTGGTGCTCGTGGAAGCTCCGCAGCAGCTTAA Protein Sequence MTNEKVWIEKLDNPTLSVLPHDFLRPQQEPYTKQATYSLQLPQLDVPHDSFSNKYAVALSVWAALIYRVTGDDDIVLYIANNKILRFNIQPTWSFNELYSTINNELNKLNSIEANFSFDELAEKIQSCQDLERTPQLFRLAFLENQDFKLDEFKHHLVDFALNLDTSNNAHVLNLIYNSLLYSNERVTIVADQFTQYLTAALSDPSNCITKISLITASSKDSLPDPTKNLGWCDFVGCIHDIFQDNAEAFPERTCVVETPTLNSDKSRSFTYRDINRTSNIVAHYLIKTGIKRGDVVMIYSSRGVDLMVCVMGVLKAGATFSVIDPAYPPARQTIYLGVAKPRGLIVIRAAGQLDQLVEDYINDELEIVSRINSIAIQENGTIEGGKLDNGEDVLAPYDHYKDTRTGVVVGPDSNPTLSFTSGSEGIPKGVLGRHFSLAYYFNWMSKRFNLTENDKFTMLSGIAHDPIQRDMFTPLFLGAQLYVPTQDDIGTPGRLAEWMSKYGCTVTHLTPAMGQLLTAQATTPFPKLHHAFFVGDILTKRDCLRLQTLAENCRIVNMYGTTETQRAVSYFEVKSKNDDPNFLKKLKDVMPAGKGMLNVQLLVVNRNDRTQICGIGEIGEIYVRAGGLAEGYRGLPELNKEKFVNNWFVEKDHWNYLDKDNGEPWRQFWLGPRDRLYRTGDLGRYLPNGDCECCGRADDQVKIRGFRIELGEIDTHISQHPLVRENITLVRKNADNEPTLITFMVPRFDKPDDLSKFQSDVPKEVETDPIVKGLIGYHLLSKDIRTFLKKRLASYAMPSLIVVMDKLPLNPNGKVDKPKLQFPTPKQLNLVAENTVSETDDSQFTNVEREVRDLWLSILPTKPASVSPDDSFFDLGGHSILATKMIFTLKKKLQVDLPLGTIFKYPTIKAFAAEIDRIKSSGGSSQGEVVENVTANYAEDAKKLVETLPSSYPSREYFVEPNSAEGKTTINVFVTGVTGFLGSYILADLLGRSPKNYSFKVFAHVRAKDEEAAFARLQKAGITYGTWNEKFASNIKVVLGDLSKSQFGLSDEKWMDLANTVDIIIHNGALVHWVYPYAKLRDPNVISTINVMSLAAVGKPKFFDFVSSTSTLDTEYYFNLSDKLVSEGKPGILESDDLMNSASGLTGGYGQSKWAAEYIIRRAGERGLRGCIVRPGYVTGASANGSSNTDDFLLRFLKGSVQLGKIPDIENSVNMVPVDHVARVVVATSLNPPKENELAVAQVTGHPRILFKDYLYTLHDYGYDVEIESYSKWKKSLEASVIDRNEENALYPLLHMVLDNLPESTKAPELDDRNAVASLKKDTAWTGVDWSNGIGVTPEEVGIYIAFLNKVGFLPPPTHNDKLPLPSIELTQAQISLVASGAGARGSSAAA
yeGFP	—	yeast-enhanced green fluorescent protein	6025..6742	Fwd
DNA Sequence ATGTCTAAAGGTGAAGAATTATTCACTGGTGTTGTCCCAATTTTGGTTGAATTAGATGGTGATGTTAATGGTCACAAATTTTCTGTCTCCGGTGAAGGTGAAGGTGATGCTACTTACGGTAAATTGACCTTAAAATTTATTTGTACTACTGGTAAATTGCCAGTTCCATGGCCAACCTTAGTCACTACTTTAACTTGGGGTGTTCAATGTTTTTCTAGATACCCAGATCATATGAAACAACATGACTTTTTCAAGTCTGCCATGCCAGAAGGTTATGTTCAAGAAAGAACTATTTTTTTCAAAGATGACGGTAACTACAAGACCAGAGCTGAAGTCAAGTTTGAAGGTGATACCTTAGTTAATAGAATCGAATTAAAAGGTATTGATTTTAAAGAAGATGGTAACATTTTAGGTCACAAATTGGAATACATTTATAACTCTCACAATGTTTACATCACTGCTGACAAACAAAAGAATGGTATCAAAGCTAACTTCAAAATTAGACACAACATTGAAGATGGTTCTGTTCAATTAGCTGACCATTATCAACAAAATACTCCAATTGGTGATGGTCCAGTCTTGTTACCAGACAACCATTACTTATCCACTCAATCTGCCTTATCCAAAGATCCAAACGAAAAGAGAGACCACATGGTCTTGTTAGAATTTGTTACTGCTGCTGGTATTACCCATGGTATTGATGAATTGTACAAATAA Protein Sequence MSKGEELFTGVVPILVELDGDVNGHKFSVSGEGEGDATYGKLTLKFICTTGKLPVPWPTLVTTLTWGVQCFSRYPDHMKQHDFFKSAMPEGYVQERTIFFKDDGNYKTRAEVKFEGDTLVNRIELKGIDFKEDGNILGHKLEYIYNSHNVYITADKQKNGIKANFKIRHNIEDGSVQLADHYQQNTPIGDGPVLLPDNHYLSTQSALSKDPNEKRDHMVLLEFVTAAGITHGIDELYK
AmpR	bla	beta-lactamase	8187..9048	Rev
DNA Sequence ATGAGTATTCAACATTTCCGTGTCGCCCTTATTCCCTTTTTTGCGGCATTTTGCCTTCCTGTTTTTGCTCACCCAGAAACGCTGGTGAAAGTAAAAGATGCTGAAGATCAGTTGGGTGCACGAGTGGGTTACATCGAACTGGATCTCAACAGCGGTAAGATCCTTGAGAGTTTTCGCCCCGAAGAACGTTTTCCAATGATGAGCACTTTTAAAGTTCTGCTATGTGGCGCGGTATTATCCCGTATTGACGCCGGGCAAGAGCAACTCGGTCGCCGCATACACTATTCTCAGAATGACTTGGTTGAGTACTCACCAGTCACAGAAAAGCATCTTACGGATGGCATGACAGTAAGAGAATTATGCAGTGCTGCCATAACCATGAGTGATAACACTGCGGCCAACTTACTTCTGACAACGATCGGAGGACCGAAGGAGCTAACCGCTTTTTTGCACAACATGGGGGATCATGTAACTCGCCTTGATCGTTGGGAACCGGAGCTGAATGAAGCCATACCAAACGACGAGCGTGACACCACGATGCCTGTAGCAATGGCAACAACGTTGCGCAAACTATTAACTGGCGAACTACTTACTCTAGCTTCCCGGCAACAATTAATAGACTGGATGGAGGCGGATAAAGTTGCAGGACCACTTCTGCGCTCGGCCCTTCCGGCTGGCTGGTTTATTGCTGATAAATCTGGAGCCGGTGAGCGTGGGTCTCGCGGTATCATTGCAGCACTGGGGCCAGATGGTAAGCCCTCCCGTATCGTAGTTATCTACACGACGGGGAGTCAGGCAACTATGGATGAACGAAATAGACAGATCGCTGAGATAGGTGCCTCACTGATTAAGCATTGGTAA Protein Sequence MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYIELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYSPVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRWEPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSALPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGASLIKHW

promoter 6

Label	Gene	Product	Position	Strand
LYS2 promoter	S. cerevisiae LYS2	—	164..404	Fwd
DNA Sequence AATTCCACTTGCAATTACATAAAAAATTCCGGCGGTTTTTCGCGTGTGACTCAATGTCGAAATACCTGCCTAATGAACATGAACATCGCCCAAATGTATTTGAAGACCCGCTGGGAGAAGTTCAAGATATATAAGTAACAAGCAGCCAATAGTATAAAAAAAAATCTGAGTTTATTACCTTTCCTGGAATTTCAGTGAAAAACTGCTAATTATAGAGAGATATCACAGAGTTACTCACTA
T7 promoter	—	—	5289..5308	Fwd
DNA Sequence TAATACGACTCACTATAGG
GAP promoter	S. cerevisiae TDH3	—	5334..6001	Fwd
DNA Sequence TCATTATCAATACTGCCATTTCAAAGAATACGTAAATAATTAATAGTAGTGATTTTCCTAACTTTATTTAGTCAAAAAATTAGCCTTTTAATTCTGCTGTAACCCGTACATGCCCAAAATAGGGGGCGGGTTACACAGAATATATAACATCGTAGGTGTCTGGGTGAACAGTTTATTCCTGGCATCCACTAAATATAATGGAGCCCGCTTTTTAAGCTGGCATCCAGAAAAAAAAAGAATCCCAGCACCAAAATATTGTTTTCTTCACCAACCATCAGTTCATAGGTCCATTCTCTTAGCGCAACTACAGAGAACAGGGGCACAAACAGGCAAAAAACGGGCACAACCTCAATGGAGTGATGCAACCTGCCTGGAGTAAATGATGACACAAGGCAATTGACCCACGCATGTATCTATCTCATTTTCTTACACCTTCTATTACCTTCTGCTCTCTCTGATTTGGAAAAAGCTGAAAAAAAAGGTTGAAACCAGTTCCCTGAAATTATTCCCCTACTTGACTAATAAGTATATAAAGACGGTAGGTATTGATTGTAATTCTGTAAATCTATTTCTTAAACTTCTTAAATTCTACTTTTATAGTTAGTCTTTTTTTTAGTTTTAAAACACCAAGAACTTAGTTTCGAATAAACACACATAAACAAACAAA
T3 promoter	—	—	6987..7006	Rev
DNA Sequence AATTAACCCTCACTAAAGG
lac promoter	—	—	7074..7105	Rev
DNA Sequence TTTACACTTTATGCTTCCGGCTCGTATGTTG
AmpR promoter	bla	—	9048..9153	Rev
DNA Sequence CGCGGAACCCCTATTTGTTTATTTTTCTAAATACATTCAAATATGTATCCGCTCATGAGACAATAACCCTGATAAATGCTTCAATAATATTGAAAAAGGAAGAGT

protein_bind 2

Label	Gene	Product	Position	Strand
lac operator	—	—	7050..7067	Fwd
DNA Sequence TTGTTATCCGCTCACAA
CAP binding site	—	—	7119..7141	Fwd
DNA Sequence ATGAGTGAGCTAACTCACATTA

rep_origin 2

Label	Gene	Product	Position	Strand
f1 ori	—	—	4670..5126	Rev
DNA Sequence ACGCGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGTGACCGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCTTCCTTTCTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCCTTTAGGGTTCCGATTTAGTGCTTTACGGCACCTCGACCCCAAAAAACTTGATTAGGGTGATGGTTCACGTAGTGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTGGAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTCCAAACTGGAACAACACTCAACCCTATCTCGGTCTATTCTTTTGATTTATAAGGGATTTTGCCGATTTCGGCCTATTGGTTAAAAAATGAGCTGATTTAACAAAAATTTAACGCGAATTTTAACAAAATATTAACGCTTACAATTT
ori	—	—	7428..8017	Rev
DNA Sequence TTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAACAAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACTCTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTTCTTCTAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATACCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGTCTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCTGAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACTGAGATACCTACAGCGTGAGCTATGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAGGCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGCTTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTGACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAA

terminator 1

Label	Gene	Product	Position	Strand
ADH1 terminator	S. cerevisiae ADH1	—	6762..6950	Fwd
DNA Sequence GCGAATTTCTTATGATTTATGATTTTTATTATTAAATAAGTTATAAAAAAAATAAGTGTATACAAATTTTAAAGTGACTCTTAGGTTTTAAAACGAAAATTCTTATTCTTGAGTAACTCTTTCCTGTAGGTCAGGTTGCTTTCTCAGGTATAGTATGAGGTCGCTCTTATTGACCACACCTCTACCGG